Haute sensibilité pour la recherche biomoléculaire
S’appuyant sur la technologie cryogénique SuperCOOL MARVEL, qui associe haute sensibilité et maîtrise des coûts, la SuperCOOL MARVEL HCN est optimisée pour les applications de résonance magnétique nucléaire (RMN) biomoléculaire. Dotée d’une capacité de triple résonance pour ¹H/¹⁹F, ¹³C et ¹⁵N, ainsi que de préamplificateurs cryogéniques dédiés aux canaux ¹H/¹⁹F et ¹³C, elle offre d’excellentes performances pour l’étude des protéines, des peptides et des acides nucléiques.
La SuperCOOL MARVEL HCN est particulièrement adaptée aux laboratoires recherchant une solution RMN à haute sensibilité et à coût maîtrisé pour la recherche biomoléculaire.
Caractéristiques principales de la sonde cryogénique
- Sonde RMN à triple résonance et haute sensibilité pour les applications biomoléculaires (¹H/¹⁹F, ¹³C et ¹⁵N)
- Sensibilité accrue pour la détection du ¹H et du ¹³C, avec un gain d’environ 2 à 3 fois par rapport à une sonde HCN à température ambiante équivalente
- Système refroidi à l’azote liquide, économique, avec de faibles coûts d’exploitation et de maintenance
Avantages pour les laboratoires
- Mesures RMN à haute sensibilité pour les protéines, peptides et acides nucléiques
- Réduction de la durée des expériences et augmentation du débit expérimental du laboratoire
- Amélioration de l’analyse des échantillons biomoléculaires faiblement concentrés ou disponibles en quantité limitée
- Coûts d’exploitation inférieurs à ceux des systèmes de sondes cryogéniques utilisant l’hélium
- Fonctionnement continu grâce au système de refroidissement à l’azote en circuit ouvert
Applications en recherche biomoléculaire
La sonde SuperCOOL MARVEL HCN est utilisée pour de nombreuses applications en RMN des solutions :
- Détermination et caractérisation structurale des protéines
- Expériences d’attribution du squelette protéique
- Études des interactions protéine-ligand
- Caractérisation des biomédicaments et des produits biopharmaceutiques
- Analyse des peptides
- Recherche sur l’ARN et autres acides nucléiques
- Analyse d’échantillons biomoléculaires faiblement concentrés
- Méthodes avancées de RMN à triple résonance
Exemples de spectres
Gain de sensibilité de la sonde :
Les spectres ci-dessous présentent la superposition de spectres RMN 1D ¹⁵N-HSQC d’une ubiquitine marquée au ¹³C/¹⁵N à 0,35 mM, acquis dans des conditions identiques avec la sonde SuperCOOL MARVEL HCN (bleu) et avec une sonde HCN à température ambiante (magenta).
Spectre 2D NOESY du lysozyme
Ci-dessous est présenté un spectre 2D NOESY (temps de mélange, τm = 150 ms) d’une solution de lysozyme à 0,5 mM dans un tampon phosphate à 20 mM (H₂O/D₂O = 90/10). Le spectre a été acquis avec 8 scans par incrément, pour une durée totale d’expérience de 2 heures (panneau de gauche).
Une région sélectionnée de l’empreinte du spectre protéique est comparée au spectre correspondant acquis avec une sonde HCN à température ambiante (panneau de droite). Plusieurs pics de corrélation NOE de faible intensité n’ont été détectés qu’avec la sonde SuperCOOL MARVEL HCN.
Spectre 3D CBCA(CO)NH de l’ubiquitine
Un spectre 3D CBCA(CO)NH d’une ubiquitine marquée au ¹³C/¹⁵N à 0,35 mM est présenté sous forme de représentation en cube (à gauche) et sous forme de projection selon l’axe F₂ du plan F₃–F₁ (à droite).
Le spectre a été acquis avec 8 scans par incrément pendant une durée de 2 heures, en utilisant un échantillonnage non uniforme (NUS) à 12,5 %.
Spectres HSQC du peptide cyclique ocytocine
Les spectres HSQC ¹³C et HSQC ¹⁵N du peptide cyclique ocytocine (1 mg dans 250 µL) sont présentés ci-dessous.
Les spectres HSQC ¹³C et HSQC ¹⁵N ont été acquis respectivement avec 4 et 16 scans par incrément, chaque expérience étant réalisée en moins de 30 minutes.
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